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噬菌体展示技术与抗体药物研发真人彩票app真钱体育官网

文章来源:未知时间:2020-09-30 点击:

  2018年诺贝尔化学奖尘埃落定☆-◆◇,授予Frances A•rnold☆☆-■◁、Geo-rge… Smith■○◇、Greg▽ory Winter三人●☆-。行业门户网站其中★▪化学奖一半的奖金授予美国科学家Franc▼es Arnold…□,奖励▪她◁的工作实现了酶的定向进化-△;另一半的奖金授予英国科学家Gregory Win▽ter以及美国科学家George Smith-◁,以奖励他们在肽类和抗体的噬▽菌体展示技术的巨大成就•★△△▪。

  科学技术的发展是药物研发的动力◇■,Smith等人发展出噬菌体展示技术▲●△★•,使得抗体药物的研发有了突破性进☆展☆◁●。噬菌体▷展示技术已成为最重要的药物筛选平台之一▼◇,它不仅可以用于多肽○○•、单抗的筛选●○,也可以用于其他蛋白质的筛选•▼☆,其筛选的多样性也是该技术的亮点之一▼○。

  那么▽▲,什么是噬菌体展示技术呢▷-▪?该技术是由Smith于1985年开发▽▲▼…△□,之后Winter继续发展◁了该技术●▲△=★▽,他们所用的工-具是基因工程改造过的噬菌体一种可以感染细菌的病毒▲★-◇◁,作为宿主★◆。具体▲过程如下•◁◁图所示▼▪▽◆:

  A-◆▷□▲★.基因工程将编码多肽或蛋白文库的DNA序列插入到噬菌体的外壳蛋白基因☆•-△◇…,这样•□★-☆,多肽或蛋白就可■以表•达在噬菌体的…表面○▪;B☆▼☆▼■.噬菌体转化到宿主细胞内…●□,成熟的噬菌体从宿主中释放出○来◁▪◁。1○△○□•▽.用固定有靶蛋白的培养板捕捉能特异结合靶蛋白的噬-菌体△▪☆;2••▽☆.洗去未与-靶点结合的噬菌体-◆;3 将与靶点结合的噬菌体洗脱下来进行下一轮转化▼★-;4▪=….进行下一▼轮感染与转化●□△;5★△●▽.进一步放•大目标噬菌▪体的数量▽=△。这样★▪◁,商业照明灯具基础知识循环往复◁■▷=☆▪,就可以得到想要◁☆的高亲◁▪和性抗○体▪●☆▽。

  那么-△•,这么▼做有什么好◁处呢▷◆■△□?首先•◁--▼•,并不◆是所有文库中表达的☆蛋白质表位都◆是有用的○◇=○▼◇,这样可以筛•选感兴趣的表位△•◇▪,以保证候选药物的活性最佳★■□△;其次★◁•…▼,在体▷外实○验中=□◁,可以筛选人源与非人源…=●靶点○▲■▷,这就节省了临☆床前试验的时间△△▽◆□。

  目前▼▷,已有多种抗体▼药•物利用该技术成功上市-▪,Adalimumab单抗就是其中最出•色的一例…□▷●,成功研发的第一个全人源重组IgG1▪□□•○▲:单克隆抗体○◁▪▽•▲,该药物近年来一直雄踞畅销药物的榜首•…=•○,2017年●…•,其销售额•为184亿美元○•。此外◇■,还有多个利▲用该技术的药物=成功上市▷=▲,有一批待上市的药物处于●临床试验之中◁-。下面就让我们了解这些成功上市的药物■•◁。

  Adalimumab○是全人▼源重组Ig▲G1-单克隆抗体○△◆■,该药是首个获批的•抗肿瘤坏死因子TNF药物▷■▪◆,用于治疗类风湿性关节炎于2002年在美国上市●◆○•。Adalimumab利用噬菌体展示技术△的▼▼☆★▷“指导选择☆■▽▼△•”筛选△=●出★来☆▷的-▪■•▲●。该步◆骤分为两步▪-…,首先研究人员发展◇出了鼠源抗人类TNF抗体MAK195-▼◇,但是鼠源抗体不能作为自身免疫病的药物☆◆☆◆,于是他们利用这个鼠源抗体指导分离与MAK195有相同表位的人源抗体◆•◇◁△。利用MAK195的重链▽与轻链在蛋○▪▼白库中找到配对的人□类D◁NA序列☆…,之后利用噬菌体展示技术进一步◁筛选•△■,得到高亲和性的抗TNF抗体▷-…▪。这就形成了A•dalimumab☆单抗…☆。

  Belimumab是人源IgG1单克隆抗体-★△★•。由Cambri•dge◇ Antibody Technol◁ogy 与 Human Genom▽e Sciences (GlaxoSmithKline公司)联合研发◇…△,于2011年被批准上市=…★-△◇,用于治疗系…统性▪红斑狼疮•◁▼,是50多年来首个用于治疗系统性狼疮的靶向药▷▼□●•▷。Belimumab可以▲与B淋巴细胞刺激因子(BL◇yS)结合●•,阻止BLyS与B淋巴▽细■胞结合△◆▷○△▷,促进B淋巴细胞凋亡■□。研究人员利用单链可变片段(scFv)噬菌体展示技术筛选了1200个抗体=•◁•,得到亲和力•较高的Belimumab•△◆,临床前研▽●究表明▲▼,该药可以抑制食蟹猕▪猴的B淋巴细胞生长★○。临床试◇验表明◇▼☆◁▪,Belimumab可○以有效改善患者病情■▽□▷。

  Ranibizumab由Genentech公司研发◆★,是与VEGF-A结合并抑制其活性的抗原结合片段(Fab)☆★○。鼠源性★抗▽体A4☆●▼▽○.6-▼□●•….1在小鼠肿瘤模型中有…很好的•应用■○=,并且•得到△了抗肿瘤药△Bevacizumab (Avastin®)■▷■☆,Ranibizumab也是A4-☆▷.6■◆○△▲◆.1的突变▲位点的候选化合物☆▪=▲-。Clone Y0317(也就是Ranibizumab)对VEGF-A的亲□和○力为0☆●□■.1nM○☆◇▷,仅含•◁有…6个与亲本不同的突变△◇,且将对VEG□F的亲和力提高了100多倍•○◆▷▼,大大减少了用药剂量□▪。该药于2006年被○批准上市••,用于治疗年龄相关性黄斑病变■=◁△◆,2010年被批准用于治疗糖尿病性黄斑水肿◇●,2015年被批准用于治疗糖尿病性视网膜病变△▪▷▷•。

  Ecanllantide是由60个氨基酸组成◆…☆◇,是一种重组激肽释放酶蛋白抑制剂□=□。使用人类脂蛋白相关凝血抑制剂(LACI-D1)的第一个Kunitz结构域构建的噬菌体展示文库-作为支架发现了Ecallantide▽■●。该药于2009年批准★上市-☆▽△,用于治疗遗传性血管•性水肿▷(HAE)这种罕见的遗传性疾病◁▼=■。

  Romip-l▷ostim含有两个相同的亚单位◇▼,每个亚单位分别由一个▲IgG1 Fc结构区和c-M▲pl结合区共价结合○构成•••◇,结合促血小板生成受体(TPOR)★▼,于2008年由美国FDA批准◁上市▪•=,该药物是首个由FDA批准=的肽体药物▼▼◁▲▷,也是首个◁并且是唯一的血小板生成药物▲▼。

  Raxibacumab是一-种人源单克隆IgG1抗体▼●▷▼▷,用于治疗和预防…由炭疽杆菌感染造成的疾病◁◁,Raxibacuma▲b☆结合炭疽杆菌的保护性抗原•◁□=,阻止细菌毒素的▷释放■○▽•◆◆。该药由Huma◇n Genome Scie◇nces研发○▷▼,试验证明▲▼•,Raxib△ac▽umab明显增加了兔子与猴的生存•期•★。

  Ramu☆cirumab也是从de▪Haard Fab噬菌体展示技术文库中筛选得到的■◁◆•▲,VEG•FR2药物●◇◇★…,Ramucirumab是利用人类Fabs非免疫▼的噬菌体展示•技术文库▽-◆▽•△,通过PC=R扩增得○到的人源重链与轻链…●◁□▲☆。在临床前研究中■▽□=□,该药显示出优良的抗肿瘤活性▷▽,在临床III试验中显示☆•,该药对多种肿瘤具有显著的抑制效果☆◆…▼▷。2014年由美国FDA批准上市•▲■◆=•,用于◆治疗晚期●胃癌或胃食管结合部腺癌□…□△。

  除了上述的上市药物◆…▷,还有更多的药物处于正△▪在临床试•验中▼◁●◆□▽。在抗体药▲与蛋白质药物筛选方面•-▲▷□,噬菌体展示技术△显示出巨大△的优越性★•,提高了-药物研发的成功率◆-□■=,也节省了药物筛选的时间…与费用▽△…。噬菌体展示技术与抗体药物研发真人彩票app真钱体育官网

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